Hoe Elisa-bord kiezen?

ELISA met slecht resultaat?Volg ons om het juiste Elisa bord te kiezen.

Het kiezen van een geschikte ELISA-plaat is de eerste stap naar een succesvol ELISA-experiment, maar veel mensen negeren dit. Wanneer mensen experimenten doen, kijken ze vaak alleen naar het experiment zelf, maar weten ze niet dat het product vaak een grote impact heeft op het experiment. Een juiste selectie van producten zal bijdragen aan het succes van het experiment. We houden gewoonlijk rekening met de volgende factoren bij het uitvoeren van ELISA-experimenten:

1.De vorm van de bodem:

Op dit moment ontwerpen de fabrikanten de met enzym gelabelde putjes als onafhankelijke kolommen en vergroten ze op passende wijze de afstand tussen de putjes zodat ze onafhankelijk van elkaar kunnen worden gescheiden, waardoor kruisbesmetting wordt geminimaliseerd. Verschillende soorten Elisa-platen hebben verschillende vormen van de putbodem. Hier zijn enkele veelvoorkomende vormen van de bodem van het gat:

Vlakke bodem: De bodem is horizontaal, ook wel F-bodem genoemd. Het licht zal niet door de bodem worden afgebogen, wat het licht het meest kan doorlaten. Gebruik voor experimenten die een ronde bodem vereisen voor zichtbaarheid of andere redenen.

Round Bottom: Ook bekend als U-bottom, biedt de beste reinigingsresultaten en hybride prestaties, geschikt voor toepassingen die sedimenten moeten testen.

C-bodem: het kan een goed reinigend effect hebben tussen de platte bodem en de ronde bodem, terwijl de voordelen van de vlakke bodem worden gecombineerd.

Cone Bottom: Ook bekend als V-bottom, is het geschikt voor nauwkeurige bemonstering en opslag van micromonsters voor optimaal herstel van kleine volumes.

2. De kleur van Elisa-plaat:

Er zijn drie kleuren van het Elisa bord: transparant, zwart en wit.

De meerderheid van ELISA kiest transparante platen als experimentele materialen. Witte en zwarte Elisa-platen worden over het algemeen gebruikt voor luminescentiedetectie. De zwarte ELISA-plaat zelf absorbeert licht, dus het signaal is zwakker dan dat van de witte ELISA-plaat. Zwarte Elisa-platen worden over het algemeen gebruikt om sterker licht te detecteren, zoals fluorescentiedetectie; integendeel, witte Elisa-platen kunnen worden gebruikt voor detectie van zwakker licht en worden vaak gebruikt voor algemene chemiluminescentie en substraatkleurontwikkeling (zoals dubbele luciferase). reportergenanalyse).

3. Het materiaal van Elisa-plaat:

Veelgebruikte materialen zijn polyethyleen (PE), polypropyleen (PP), polystyreen (PS), polyvinylchloride (PVC) en polycarbonaat (PC).

De meest gebruikte materialen in ELSIA zijn polystyreen en polyvinylchloride. Polyvinylchloride zacht karton is dun, kan worden gesneden en de prijs is laag. Het nadeel is dat de afwerking niet zo goed is als de polystyreenplaat en dat de bodem van het gat niet zo vlak is als polystyreen. Maar ook de bijbehorende achtergrondwaarde zal toenemen. Gewoonlijk wordt een ionentransplantatiebehandeling uitgevoerd op het oppervlak van de ELISA-plaat en worden actieve functionele groepen zoals aldehydegroepen, aminogroepen en epoxygroepen in het polymeeroppervlak geïntroduceerd om de prestatie van het substraatoppervlak te verbeteren.

4. verschillende bindingsmechanismen

Efficiënte binding van het coatingmateriaal aan het bodemoppervlak van de plaat is een cruciale stap in ELISA. Daarom moeten de structurele kenmerken en chemische eigenschappen van de te coaten stof vóór het experiment zorgvuldig worden geanalyseerd om een ​​geschikte Elisa-plaat te selecteren. Over het algemeen zijn er verschillende manieren om het coatingmateriaal aan de bodem van de plaat te binden: passieve adsorptie, covalente binding en affiniteitsvangst.

Passieve adsorptie: Het mechanisme van passieve adsorptie is complex en de binding tussen het coatingmateriaal en de bodem van de plaat is voornamelijk afhankelijk van intermoleculaire krachten (van der Waals-kracht) en waterstofbruggen. Bij de meeste ELISA's wordt de binding van de bekledingsstof aan de bodem van de plaat bewerkstelligd door passieve adsorptie. In het algemeen wordt de binding tussen antigenen (of antilichamen) met een gemiddeld en groot molecuulgewicht en de bodem van de plaat tot stand gebracht door passieve adsorptie. Bij de keuze voor een Elisa-plaat wordt vaak rekening gehouden met de hydrofobe/hydrofiele eigenschappen van het bodemoppervlak van de plaat. De volgende tabel geeft een overzicht van het toepassingsgebied en het gebruik van verschillende hydrofiele ondergronden:

Affiniteitsopname: Affiniteitsopname is gebaseerd op de specifieke binding van gelabelde macromoleculen aan hun overeenkomstige receptoren. Gelabelde macromoleculen kunnen worden verkregen door chemische koppeling of door genetische manipulatie.

Kenmerken van Affinity Capture zijn:

1.hoge specificiteit;

2. Kan de signaal-ruisverhouding van meetresultaten verbeteren

De meest voorkomende putbodemoppervlakken zijn: met streptavidine (streptavidine) gecoat oppervlak; nikkelchelaat (nikkelchelaat) gecoat oppervlak en glutathion (Glutathion, GSH) gecoat oppervlak.

3. Streptavidine-oppervlak: De hoge affiniteit en specificiteit van streptavidine en biotine worden gebruikt om de binding van de bodemplaat aan het gecoate eiwit te realiseren.

4. Nikkelchelaatoppervlak: Nikkelchelaat wordt aan het polymeeroppervlak gehecht om fusie-eiwitten te binden met His (histidine)-tags.

5. Glutathionoppervlak: Gebruik van enzym- en substraatspecificiteit tussen glutathion en glutathionsulfhydryltransferase (GST) om binding van de bodemplaat aan het manteleiwit te bewerkstelligen.

Waarom kiezen voor BKMAM Elisa plaat?

1. Gemaakt van 100 procent polystyreen materiaal,
   

2. Geschikt voor hechtende celcultuur,

3. Vlakke basis, gelijkmatige dikte en uniforme maat voor reactiepolen,

4. Steriel met individuele verpakking,

5. Hoge kwaliteit met fabrieksprijs.