De microbiële kennis die u zoekt
Micro-organismen zijn een groep kleine organismen die wijdverspreid in de natuur voorkomen en onzichtbaar zijn voor het blote oog en honderden, duizenden of zelfs tienduizenden keren moeten worden vergroot met behulp van een optische microscoop of een elektronenmicroscoop. Ze hebben de voordelen van klein formaat, eenvoudige structuur, snelle reproductie, gemakkelijke variatie en sterk aanpassingsvermogen aan de omgeving.
Classificatie van micro-organismen:
Er zijn veel soorten micro-organismen, in ieder geval meer dan 100,000 soorten. Volgens hun structuur, chemische samenstelling en leefgewoonten en andere verschillen kunnen worden onderverdeeld in drie categorieën.
Eukaryote microbiële celkern heeft een hogere mate van differentiatie, inclusief kernmembraan, nucleolus en chromosomen; cytoplasma heeft complete organellen (zoals endoplasmatisch reticulum, ribosoom en mitochondriën, enz.). Schimmels behoren tot dit type micro-organisme.
Prokaryotische microbiële cellen hebben een lage mate van nucleaire differentiatie, alleen primitief nucleoplasma, geen kernmembraan en nucleolus; organellen zijn niet erg compleet. Er zijn veel soorten van dergelijke micro-organismen, waaronder bacteriën, spirocheten, mycoplasma, rickettsia, chlamydia en actinomyceten.
Acellulaire micro-organismen hebben geen typische celstructuur en geen enzymsysteem om energie op te wekken, en kunnen alleen groeien en zich voortplanten in levende cellen. Virussen behoren tot dit type micro-organisme.
Scheiding en zuivering van micro-organismen
Een microbiële cultuur die meer dan één soort bevat, wordt een gemengde cultuur genoemd. Als alle cellen in een kolonie zijn afgeleid van één oudercel, wordt de kolonie pure cultuur genoemd. Bij de identificatie van bacteriesoorten wordt over het algemeen vereist dat de gebruikte micro-organismen zuivere culturen zijn. Het proces van het verkrijgen van pure cultuur wordt scheiding en zuivering genoemd en er zijn veel methoden.
1. Gietplaatmethode
Eerst wordt de microbiële suspensie in een reeks verdund en een bepaalde hoeveelheid van de verdunning wordt volledig gemengd met het opgeloste voedingsagarmedium dat op ongeveer 40-50 graden wordt gehouden, en vervolgens wordt het mengsel in een steriele petrischaal gegoten. Na stolling werd de plaat ondersteboven geïncubeerd in een constante kamer. Een enkele cel wordt vermenigvuldigd om een kolonie te vormen, een enkele kolonie wordt genomen om een suspensie te maken en de bovenstaande stappen worden verschillende keren herhaald om een zuivere cultuur te verkrijgen.
2. Methode voor het coaten van een vlakke plaat
Eerst wordt de microbiële suspensie goed verdund en wordt een bepaalde hoeveelheid van de verdunning op een steriele voedingsagarplaat geplaatst die is gestold, en vervolgens wordt de verdunning gelijkmatig verdeeld over het oppervlak van het medium met een steriele glazen spatel. Een enkele kolonie kan worden verkregen door incubatie bij een constante temperatuur.
3. Plaatschrijfmethode
De gemakkelijkste manier om micro-organismen te isoleren is strepen. Streak een kleine hoeveelheid van de cultuur op de plaat met behulp van een steriele lus. Er zijn veel manieren om te schrijven. De gebruikelijke schrijfmethoden die meer kans hebben om in een enkele kolonie te verschijnen, zijn de schuine streepmethode, de curve-methode, de vierkante methode, de stralingsmethode en de methode met vier rasters. Wanneer de inoculatielus naar achteren beweegt op het oppervlak van het medium, wordt de bacteriële vloeistof op de inoculatielus geleidelijk verdund en uiteindelijk wordt een enkele cel verspreid over de getekende lijn. Na kweek groeit elke cel uit tot een kolonie.
4. Verrijkingscultuurmethode
De methode en het principe van de verrijkingscultuurmethode zijn heel eenvoudig. We kunnen omstandigheden creëren waarin alleen de gewenste microben kunnen groeien, en onder deze omstandigheden kunnen de gewenste microben effectief concurreren met andere microben en andere microben ver overtreffen in termen van groeivermogen. Als sommige verplichte parasieten moeten worden geïsoleerd, moeten de monsters worden geïnoculeerd in de corresponderende vatbare gastheercelpopulaties om in grote aantallen te groeien. Zuivere parasitaire bacteriën kunnen worden verkregen door herhaald zaaien.
5. Anaerobe methode
Om sommige anaerobe bacteriën te isoleren, kan in het laboratorium een reageerbuis met het oorspronkelijke medium als kweekvat worden gebruikt en kan de reageerbuis enkele minuten in een kokendwaterbad worden verwarmd om de opgeloste zuurstof in het medium te verdrijven . Vervolgens wordt het snel afgekoeld en geïnoculeerd. Na inoculatie werd steriele paraffine aan het oppervlak van het medium toegevoegd om het medium van de lucht te isoleren. Een andere methode is om na inoculatie het gas in het medium te vervangen door N2 of CO2 en vervolgens de opening van de reageerbuis af te sluiten boven een vlam. Om sommige anaerobe bacteriën efficiënter te isoleren, kan het geïsoleerde monster soms op het medium worden geïnoculeerd en vervolgens kan de petrischaal in een volledig afgesloten anaëroob kweekapparaat worden geplaatst.
6. Eencellige (of enkele spore) isolatiemethode
Het is om een microscheidingsmethode te gebruiken om afzonderlijke cellen of afzonderlijke individuen uit gemengde populaties direct te isoleren voor kweek om zuivere cultuur te verkrijgen. Voor grotere micro-organismen kan een enkel individu worden geëxtraheerd met behulp van een capillair. Voor micro-organismen met relatief kleine individuen is een micromanipulator vereist om enkele microbiële cellen of sporen met een capillair of micronaald, haak, lus, enz. onder de microscoop te plukken om zuivere cultuur te verkrijgen. De eencellige scheidingsmethode stelt relatief hoge eisen aan de bedieningstechnologie.
Microbiële cultuur
1. Afhankelijk van of zuurstof nodig is tijdens de kweek, kan deze worden onderverdeeld in twee categorieën: aërobe kweek en anaërobe kweek.
Aërobe kweek: ook wel "aërobe kweek" genoemd. Dat wil zeggen, wanneer dit micro-organisme wordt gekweekt, heeft het zuurstof nodig om te worden toegevoegd, anders zal het niet goed groeien. In het laboratorium worden schuine culturen verkregen door steriele lucht van buitenaf te verkrijgen via wattenstaafjes. Het grootste deel van de vloeibare cultuur in de erlenmeyer wordt geschud door een shaker, zodat de buitenlucht continu in de fles kan komen.
Anaërobe kweek: ook wel "anaerobe kweek" genoemd. Dergelijke micro-organismen hebben geen zuurstof nodig om deel te nemen aan de teelt. In het kweekproces van anaërobe micro-organismen is het belangrijkste punt het verwijderen van de zuurstof in het medium.
2. Volgens de fysieke toestand van het medium kan het worden onderverdeeld in twee categorieën: vaste cultuur en vloeibare cultuur.
Vaste kweek: het is een methode om de stammen te inoculeren in een los en voedselrijk vast medium en om micro-organismen onder geschikte omstandigheden te kweken.
Vloeibare cultuur: in experimenten kan vloeibare cultuur ervoor zorgen dat micro-organismen zich snel vermenigvuldigen en een groot aantal culturen verkrijgen. Onder bepaalde omstandigheden is het ook een effectieve methode voor micro-organismen om bacteriën te selecteren en te verrijken.
BKMAM biotech levert overeenkomstige laboratoriumverbruiksartikelen voor microbiële kweek:
Wegwerp plastic ronde/vierkante petrischalen:
lHoge transparantie polystyreen materiaal (PS);
lHet oppervlak is glad en vlak en er is geen optische vervorming van cellen onder microscoopobservatie;
l Stapelontwerp maakt stapelen en opbergen eenvoudiger;
l Ethyleenoxidesterilisatie (EO);
l Slijtage- en corrosieweerstand.
Wegwerp plastic inentingsstok/lus:
Polystyreen materiaal (PS);
Anti-vervuiling, Endotoxine, DNase, RNase en pyrogenen vrij;
Losse verpakking is gesteriliseerd;
Vakmanschap en volledige specificaties;
Wegwerp plastic celverspreider, bacterieverspreider:
Polystyreen materiaal (PS);
Anti-vervuiling, Endotoxine, DNase, RNase en pyrogenen vrij;
L-vormig ontwerp, gemakkelijk te gebruiken;
Eenmalig gebruik, licht en handig.
Roestvrijstalen / wegwerpbare steriele specificatieplaten:
Het roestvrijstalen specificatieplaatje is gemaakt van roestvrij staal en het wegwerpbare specificatieplaatje is gemaakt van food-grade polypropyleen (PP).
Anti-vervuiling, Endotoxine, DNase, RNase en pyrogenen vrij;
Het smeergebied is strikt gestandaardiseerd
Een zijde van het typeplaatje is voorzien van een handgreep, die eenvoudig te bedienen is
Steriel verzegelde enkele verpakking om secundaire besmetting van de bemonstering en foutieve resultaten te voorkomen
Eenmalig gebruik om kruisbesmetting te voorkomen en de werkdruk te verminderen
Welkom om met ons samen te werken
Eerlijk
Michaël Peng
michael@bkmbio.com